超微量分光光度計(jì)校準(zhǔn)方式
發(fā)布時(shí)間：2025-06-09
以下是詳細(xì)解析，涵蓋核心步驟、技術(shù)要點(diǎn)及注意事項(xiàng)：
一、儀器自校準(zhǔn)功能
1. 原理與目的
超微量分光光度計(jì)通常內(nèi)置自校準(zhǔn)程序，通過儀器自帶的標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)(如暗電流校正、光源強(qiáng)度補(bǔ)償)對(duì)光學(xué)系統(tǒng)進(jìn)行初始化標(biāo)定。
自校準(zhǔn)可快速修正電子漂移、光源老化等引起的偏差，是日常維護(hù)的基礎(chǔ)步驟。
2. 操作步驟
(1) 進(jìn)入儀器菜單，選擇“自校準(zhǔn)”或“性能驗(yàn)證”模式；
（3) 儀器自動(dòng)調(diào)整至出廠預(yù)設(shè)參數(shù)，并生成校準(zhǔn)報(bào)告。
3. 局限性
自校準(zhǔn)無法糾正波長(zhǎng)偏移或光路物理變化(如光纖位移)，需結(jié)合其他方法定期驗(yàn)證。
二、外部標(biāo)準(zhǔn)溶液校準(zhǔn)
1. 適用場(chǎng)景
當(dāng)儀器用于定量分析(如核酸、蛋白濃度測(cè)定)時(shí)，需通過標(biāo)準(zhǔn)溶液驗(yàn)證吸光度準(zhǔn)確性。
常用標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)包括：
(3) NIST追溯標(biāo)準(zhǔn)溶液(如重鉻酸鉀溶液)：用于多波長(zhǎng)交叉驗(yàn)證。
2. 操作要點(diǎn)
(3)空白對(duì)照：使用同批次溶劑(如超純水)作為參比，避免溶劑雜質(zhì)干擾。
三、波長(zhǎng)校準(zhǔn)
1. 必要性
波長(zhǎng)準(zhǔn)確性直接影響定性分析(如特征吸收峰識(shí)別)。
超微量?jī)x的氙燈光源或LED光源可能發(fā)生波長(zhǎng)漂移，需定期校驗(yàn)。
2. 校準(zhǔn)方法
(3) 軟件校準(zhǔn)：部分機(jī)型支持自動(dòng)掃描標(biāo)準(zhǔn)濾光片，通過算法修正波長(zhǎng)偏移。
四、穩(wěn)定性與重復(fù)性檢測(cè)
1. 短期穩(wěn)定性
(1)連續(xù)測(cè)量同一標(biāo)準(zhǔn)樣品(如1 mg/mL BSA溶液)至少6次，記錄吸光度值(如280 nm下誤差應(yīng)<±0.005 OD)；
(2)使用標(biāo)準(zhǔn)溶液周期性驗(yàn)證(如每周一次)，記錄偏差趨勢(shì)。
五、特殊注意事項(xiàng)
1. 基座清潔與維護(hù)
(2)定期檢查光纖探頭是否磨損，避免光損失。
2. 環(huán)境控制
(2)避開強(qiáng)電磁場(chǎng)(如離心機(jī)、微波爐)，防止信號(hào)噪聲。
3. 溯源性與合規(guī)性
